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Trizol提取总RNA(二)

点击次数:  更新时间:2018/4/25 15:29:20  

RNA提取

  1. 1)取出-80℃保存样品,室温,溶解。

  2. 2)1ml Trizol加0.2ml氯仿,强烈上下混匀,室温。静置2-3min,抽提RNA。

  3. 3)用超速低温离心机4℃,15000rpm,离心15min。

  4. *离心结束后可分3层,最上层为透明水相,中间白色层为DNA和蛋白质层,最下层为有机溶剂相。

  5. 4)小心取水相RNA溶解层,移至新的1.5ml离心管中。

  6. *小心避免吸取DNA和蛋白质层

  7. 5)每毫升Trizol加0.5ml 异丙醇,轻轻上下混匀数次,室温,静置10min,沉淀RNA。

  8. 6)4℃,15000rpm,离心10min。

  9. *离心结束后可看到离心管壁贴壁形成的白色沉淀即为RNA。