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Trizol提取总RNA（一）

点击次数：  更新时间：2018/4/14 13:47:56  

Trizol提取总RNA（一）

1 细胞样品处理

      （1）6孔细胞培养板或35mm培养皿培养的细胞待70%-80%融合。

       *悬浮细胞时，离心上清液收集细胞。

      （2）彻底弃上清液，每孔加0.5-1ml Trizol,混匀，室温放置5min使细胞充分裂解。

      （3）收集细胞和裂解液，放置RNase free的1.5ml细胞离心管，-80℃保存。

      *待样本收集齐后提取总RNA。

2 组织样品处理

      （1）实验动物组织用手术刀切下1g左右，放在冰生理盐水或PBS液中洗去血液，滤纸吸去组织表面的水分。

       （2）小剪刀剪碎组织，加入1.0-1.5ml Trizol，组织研磨器或组织破碎仪破碎组织。

        * 有条件时，组织应在液氮中研磨成粉末后再加入Trizol。

       （3）4℃，1000rpm，离心5min。

       （4）上清液移至新的RNase free的1.5ml离心管中，-80℃待用。