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质粒的制备、提取(一)

点击次数:  更新时间:2018/3/14 20:50:15  

背景(1):

质粒是一种双链共价闭合的环状DNA,是染色体以外的稳定遗传因子。已经在细菌、真菌以及部分动植物细胞中发现质粒,以细菌中存在质粒最为普遍。质粒的制备与提取是分子克隆的基本技术,主要依赖于限制性核酸内切酶,DNA连接酶和其他修饰酶的作用,分别对目的基因和载体DNA进行适当切割和修饰后,将两者连接在一起,再导入宿主细胞,实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。

背景(2):

       克隆的目的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能及基因表达调控的机制,明了其利用价值和途径。质粒包括基因过表达质粒、干扰质粒和启动子质粒等等多种类型,主要的差别在于其载体和克隆片段的不同,实验方法多样,但基本原理相似。