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做微量免疫电泳实验方法

点击次数:  更新时间:2017/5/10 13:59:02  

1.首先铺好琼脂板,然后在琼脂板上打孔划槽,在电泳的时候不要把槽中的琼脂挑出来还有在槽的两纵向平行边先不划开。

 

2.然后就是加样把样品加入到琼脂板的上孔里充满抗原溶液,在下孔里面也要充满着指示蛋白才行。

 

3.跟上面的操作方法一样,然后把电流强度调到2~4mA/cm。接下来当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可以停止电泳了。一般所需要的时间为40~60min左右。

 

4.当电泳结束后,我们要从琼脂板中间的槽里用牙签把琼脂凝胶挑出来,并且加入免疫血清。然后将琼脂板放在温盒里面或者培养皿中,盖好盖子放上一夜。第二日就可以观察到凝胶内出现的沉淀线。在一般情况下每一沉淀线所代表一种抗原的成分。我们可以根据沉淀的数量、位置可以判断抗原的纯度以及抗原蛋白质的种类。微量免疫电泳经常用在于分析样品的血清成分的一个方法。

 

5.最后我们可以通过免疫电泳的图谱就可以直接观察到抗原抗体沉淀线,也可以用0.1%的氨基黑染色后观察。如果需要保存的话可以拍照把它记录下来。