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非标记抗体免疫电镜原理

点击次数:  更新时间:2017/4/21 14:12:43  

非标记抗体免疫电镜


我们的这个不标记抗体法是通过系统的非标记抗体的免疫学的一个反应,对组织中的抗原进行定位检测。它们分别为用标记物显示和不同标记物显示的两种方法。它这个前者是利用了基因工程方法制备双特异性抗体的F(ab′)2,分别为一个Fab片段与标本中的抗原结合,一个Fab是抗体蛋白的结合片段。抗体与标本作用后,加入铁蛋白与抗体结合,显示组织内抗原的所在部位。后者则使用磷酸钨负染后直接用电镜观察。


实验方法原理


我们这个标记抗体法虽然具有了许多优点,但是也存在了一些难以克服的问题,比如标记抗体的分子会增大,还有就是对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法它可以避免上面所说的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。不标记抗体法又可以分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。前者是利用基因工程方法制备双特异性抗体的F(ab′)2,一个Fab片段与标本中的抗原结合,一个Fab是抗体蛋白的结合片段。在抗体与标本作用后,再加入铁蛋白与抗体相结合,从而显示组织里面的抗原的所在部位。后者则用磷酸钨负染后,直接用电镜观察。