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你了解吗？一套中性粒细胞碱性磷酸酶染色的详细流程

点击次数：  更新时间：2017/11/17 8:48:33  

今天，我们继续接着讲化学染色方法之中性粒细胞碱性磷酸酶染色（偶氮偶联法），昨天的你学到了吗？（请耐心花2分钟阅读完本文，建议推荐给小伙伴一起学）

一、

实验原理

二、

试剂

（1）固定剂：10％甲醛甲醇溶液

（2）Tris-Hcl缓冲液的配制：Tris粉〔三胺基甲烷〕4.85克溶于200ml蒸馏水中,加浓HCL1-2滴，PH调至9.2，4℃保存！

（3）作用(基质液): 

磷酸萘酚钠      5mg

N-N二甲基酰胺    1ml

Tris-Hcl液       4ml

坚固蓝RR盐       5mg

（4）复染液：1%中性红

三、

实验步骤

1、新鲜、干燥的外周血或骨髓涂片（标本片及对照片）加固定剂作用30秒（染缸），水洗待干；

2、滴加作用液，室温染色15min，水洗待干；

3、1%中性红复染1min

四

注意事项

(1) 重氮盐以坚固蓝RR盐为最佳；

(2) 坚固蓝RR盐应适量：过多易造成染色失败，过少使反应减弱；

(3) 每次都要做阳性对照；

(4) 作用液新鲜配制，配好后要立即使用

五、

结果观察

(对照片成熟中性粒细胞中出现棕黑色颗粒为阳性细胞，说明染色成功) 

正常人除成熟中性粒细胞NAP可见阳性外，其它血细胞均为阴性。且正常阳性率＜40%，积分值30～130分。

六、

NAP阳性结果及积分判断标准

“－”  0分，胞浆中无阳性颗粒

“+”   1分，胞浆中含有少量颗粒

“2+”  2分，胞浆中含有中等量颗粒

“3+”  3分，胞浆中含有丰富的颗粒，但胞核清楚

“4+”  4分，胞浆中含有丰富粗大的颗粒，但胞核不清楚

七、

临床意义

增高：细菌感染、类白、AA、急淋、慢粒急变、骨髓增殖性疾病，恶性淋巴瘤。

降低：慢粒、急粒、PNH、MDS、恶组