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细胞化学染色你知多少？分享一些总结

点击次数：  更新时间：2017/11/14 13:43:53  

一、

简介

细胞化学染色是细胞学和化学相结合而成的一门科学，以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质（包括酶类、脂类、蛋白质、糖类、铁、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。

二、

目的

（1）辅助判断急性白血病的类型

（2）辅助血液系统等疾病的诊断与鉴别诊断

三、

实验步骤

（1）固定：为了保持细胞结构及化学成分的稳定性而选用的方法。根据染色的目的，最常用的固定剂有甲醛、甲醇、乙醇等。

（2）显色：通过不同的化学反应，最终形成稳定的有色沉淀，使被监测的化学物质显示出来。包括

  

偶氮偶联法：如NAP、ACP及各种脂酶染色

  

普鲁氏蓝反应：如铁染色

  

雪夫（shiff）反应：如PAS染色

  

联苯胺法：如POX染色

（3）复染：使各种目的细胞能显示出来更便于观察

四

细胞化学染色基本方法

过氧化物酶染色

中性粒细胞碱性磷酸酶染色

糖 原 染 色

非特异性酯酶染色

特异性酯酶染色

骨髓铁染色

五、

过氧化物酶(POX)染色

1、原理

2.试剂

  

(1)联苯胺酒精溶液：

  

取0.3g联苯胺加亚硝基铁氰化钠饱合液（36%）1ml,再加95%乙醇至100ml，存在于棕色瓶中，可存一年。

  

(2) 稀过氧化氢（新鲜配制）：取50ml蒸馏水加30%H2O21滴。

（3）瑞吉氏复染液 

3、染色方法

    

1、新鲜干燥涂片加联苯胺酒精溶液10滴，覆盖整个髓膜，固定1-2min。

    

2、再加等量的稀H2O2，混匀后染色4－5min,勿倒去染液直接流水冲洗。

    

3、瑞氏染液复染。

4、注意事项

 

（1）H2O2要新鲜配制，注意有效性

 

（2）标本要新鲜，最长不超过一周，时间长了酶活性减弱。

 

（3）POX染色后，一定要冲洗干净，否则染料堆积或浮于表面，影响瑞氏染色结果观察。

5、结果判定：

中性粒细胞杆状及分叶核呈强阳性是染色成功的标志(设对照片）。

在细胞的胞浆中出现蓝绿色或蓝棕色颗粒为阳性反应。

①辅助判断白血病的细胞类型。白血病的诊断以形态学为基础，但有时仅采用瑞式染色是难以判断白血病细胞的类型的。不同的细胞系列，其所含的化学物质成分、含量及分布各不相同，随着细胞的分化阶段及病理生理状态变化，这些物质的含量也会发生相应改变。因此根据细胞化学染色结果的不同，可推断细胞的所属系列。因此临床上细胞化学染色成为辅助诊断白血病必要的、有力的手段。

②其他血液系统疾病的诊断和鉴别诊断。在病理情况下，血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变，据此可以辅助疾病的鉴别诊断。如中性粒细胞碱性磷酸酶染色、铁染色等。

③观察疾病的疗效和预后。当病理状况纠正后，血细胞的化学物质的成分及含量会发生改变。

④发病机制的研究。