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大牛是这样做成骨细胞诱导实验的！

点击次数：  更新时间：2017/11/1 10:19:41  

一、实材料及试剂

培养板、酒精灯、移液枪、CO2培养箱、显微镜等MC3T3-E1（前成骨细

二、实验内容

试验方法：将MC3T3-E1（前成骨细胞）细胞接种于含MEM-α培养基（10%胎牛血清，1%青链霉素）的培养瓶内，放置于二氧化碳培养箱（37℃，5%CO2，潮湿）培养，每三天更换一次培养液，待细胞铺满瓶底的80%以上时，用胰蛋白酶消化，加入MEM-α培养基（10%胎牛血清，1%青链霉素），将细胞吹打下来并吸取到10 mL离心管中，离心，弃上清，注意不要碰到管口，加入MEM-α培养基（10%胎牛血清，1%青链霉素）重悬，将细胞按照每孔1.2×105个细胞数接种于六孔板中，实验组加含诱导剂（50ug/mL抗坏血酸和10mmol/Lβ-甘油磷酸钠）的培养液，对照组用常规培养液进行培养，每三天更换一次培养液。

三、注意事项

1、实验操作过程中要避免污染。

2、消化时间不宜过长。

3、诱导后细胞易脱壁，换液操作要尽可能轻。