冰冻切片固定实验
点击次数： 更新时间：2018/6/23 14:30:47
原位杂交中所用冰冻切片必须用多聚甲醛固定，然后再脱水。
实验步骤：
1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中，加4%PFA覆盖整个切片，盖上加湿盒，如为预先未固定过的组织，则于室温放置20 min，如是固定过的组织则放置5 min。
2. 吸去固定液，用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片，并温育5 min。
3. 用1×PBS重复步骤2操作，吸去PBS，按顺序以30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次冲洗切片，每次2 min。
4. 晾干载玻片并保存在放有干燥剂的密封盒中，于-70℃存放可达数周。开盒前应将其平衡至室温。
图一、加湿盒
本文转载自丁香园
