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细胞中酸性磷酸酶的定位3

点击次数：  更新时间：2018/4/12 16:30:07  

以新鲜动物组织为材料对细胞中酸性磷酸酶的定位

实验方法与步骤:

1 动物新鲜组织低温恒冷切片，片厚6μm，冷丙酮固定10min。

2 把切片置于酸性磷酸酶工作液中（预热至37℃），37℃处理0.5-1h。

3 蒸馏水洗3次，每次1min。

4 1%冰乙酸液处理3min。

5 蒸馏水浸洗2次，每次1min。

6 2%硫化铵液处理3-5min。

7 流水冲洗数分钟，蒸馏水洗3遍。

8 用1:30的吉姆萨染液染色15min。

9 封片

10 镜检

细胞中酸性磷酸酶的定位

注意事项：

1 孵育液必须现配先用。

2 当铅离子浓度过低时，产生的磷酸离子不能完全被结合而发生弥散，并可进入细胞核，会造成染色假阳性。

3 孵育时间过长也可能发生酶扩散和细胞核染色现象。