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病理实验技术

点击次数：  更新时间：2017/3/2 13:49:53  

实验步骤：

一、切片预处理

1.二甲苯中37℃脱蜡2次，15min/次。

2.无水乙醇浸泡2次，每次3min。

3.95%乙醇浸泡2次，每次3min。

4.PBS浸泡一次，3min。

5.2%DEPC水室温下浸泡10min。

6.PBS浸泡10min。

7.0.2mol/L HCl浸泡30min。

8.PBS浸泡2次，每次3min。

9.滴加蛋白酶K（15ug/ml），37℃孵育15min。

10.0.1%甘氨酸处理5min。

11.4%多聚甲醛再次固定10min。

12.PBS清洗2次，每次5min。

13.0.1mol/L三乙醇胺-0.25%乙酸酐孵育10min。

14.SSC清洗2次，每次5min。

15.滴加预杂交液，上面盖封口膜，使预杂交液不会干掉，随后放入湿盒，40℃孵育1-2h。