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扫描电镜之样品干燥,高手有这三大招

点击次数:  更新时间:2017/11/17 8:54:47  

扫描电镜观察样品要求在高真空中进行。无论是水或脱水溶液,在高真空中都会产生剧烈地汽化,不仅影响真空度、污染样品,还会破坏样品的微细结构。因此,样品在用电镜观察之前必须进行干燥。小编汇总了以下几种干燥方法并作出对比。


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简述


本次介绍的干燥方法主要有:空气干燥法、临界点干燥法、冰冻干燥 ;


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(实拍图)


2

空气干燥法


基本描述将经过脱水的样品,让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥 ,也可直接(不脱水)放在干燥器中干燥。


常用方法


方法1:单固定或双固定→脱水→样品置于100%的脱水剂中→在空气中自然干燥;


方法2:固定→(组织导电处理)→浸泡在缓冲液与乙醚的1:1中5min→空气干燥;


方法3:单固定或双固定→乙醇脱水→浸没于六甲基二硅胺烷HMDS中二次每次15min→通风厨干燥1h  


3

临界点干燥法(CPD: critical point dryer) 


基本含义:临界点干燥法是利用物质在临界状态时,其表面张力等于零的特性,使样品的液体完全汽化,并以气体方式排掉,来达到完全干燥的目的。


基本概念:临界点:物质的气态和液态两相之间达到相同密度、成为均一流体时的温度和压力的总称。此时的温度称为临界点温度,压力称为临 界点压力。


中间剂:把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。


常用干燥剂


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常用中间剂:


中间剂:把用来置换脱水剂而后又被干燥剂所置换的液体。


试剂:醋酸(异)戊酯、丙酮


干燥过程:固定脱水→转入中间液→移至样品室→用液体CO2置换醋酸异戊酯 →CO2汽化排气→干燥


CO2临界点干燥器工作原理


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临界点干燥失败(不彻底)的原因:


(1) 脱水不彻底


(2) 醋酸异戊酯反流


(3) 样表粘有过多醋酸异戊酯


(4) 样品量过多


(5) 样品室温度高,注入CO2困难注入CO2量太少


(6) 样品室漏气


4

冰冻干燥


基本描述:将经过冷冻的样品置于高真空中,通过升华除去样品中的水分或脱水剂的过程.


含水样品直接冷冻干燥常规步骤: 取材→固定→冷冻保护处理→快速冷冻→升华(10-2乇)干燥→装台镀膜


样品脱水后的冷冻干燥基本描述:样品用乙醇或丙酮脱水后过渡到某些易挥发的有机溶剂中,然后连同这些溶剂一起冷冻并在真空中升华而达到干燥。


5

成功案例展


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