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细胞生长曲线的测定 这些问题你遇到过吗?

点击次数:  更新时间:2016/10/7 11:43:19  


1、 问:测定细胞生长曲线的意义是什么?


答:细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。因为细胞太小,无法测单个细胞的生长状态,所以测细胞群体的生长曲线。



2、 问:如何选择细胞接种数?


答:可根据细胞传代培养过程中接种数及细胞生长周期进行计算,细胞接种数因细胞的不同而不同。



3、细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?


答:加入台盼蓝后,活细胞不着色,台盼蓝着色的细胞呈深蓝色,是不健康或已死亡的细胞,不能计数。



4、细胞生长曲线测定时为什么要做重复孔?


答:测定细胞生长曲线细胞计数时选择 3 个复孔,每孔分别计三次,取其平均值,目的是减小操作误差。



5、细胞生长曲线测定周期是几天?


答:一般是一个星期。



6、为什么绘制的细胞生长曲线没有达到平台期?


答:可能有以下原因:一是细胞接种密度过低;二是细胞培养时间过短;三是细胞生长状态不好,使其不能正常增殖。



7、为什么细胞计数第一天,细胞数没有增加反而减少?


答:一般细胞传代后,会有一个生长缓慢的潜伏期,细胞不增殖,而细胞会有正常的死亡,故细胞数不增加反而减少。



8、细胞生长曲线还有其他方法绘制吗?


答:当然有。我们提到最多的是直接计数的方法,除此以外还有相对计数的方法,该类方法首先要绘制标准曲线,标定细胞数和某个变量的函数关系,然后我们只需要测定每天这个变量的值便可以计算出细胞数。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。